Using colorimetric in situ hybridisation method for FcaPV-2 to estimate postsurgical prognosis in feline Bowenoid in situ carcinoma

Vet Dermatol. 2025 Feb;36(1):83-91. doi: 10.1111/vde.13297. Epub 2024 Sep 5.

Abstract

Background: Feline Bowenoid in situ carcinoma (BISC) is frequently associated with Felis catus papillomavirus-2 (FcaPV-2). Although surgical excision of BISC is expected to be curative, recurrent lesions are reported and it is not known whether it is a consequence of incomplete surgery or residual viral load.

Objectives: To combine colorimetric in situ hybridisation (CISH) and quantitative (q)PCR for the detection of viral DNA, and to correlate the clinical outcome of cats with BISC in which FcaPV-2 DNA is detected at surgical margins.

Animals: Twenty-seven cats with a histopathological diagnosis of BISC.

Materials and methods: Sections including core and margins of the lesions were used for histopathological evaluation, qPCR and CISH. After surgical removal of the lesion, clinical follow-up data were recorded for 6 months.

Results: Six of 12 cases in which all four histological margins were evaluable were used to correlate the infection status at the margins with the follow-up data. Four showed margin positivity, of which half relapsed as expected and half cured; two cases were negative, of which one cured as expected while the other relapsed. Fifteen cases where only three, two or one of the histological margins were evaluable, were considered to adequately correlate the status of infection with the follow-up data if CISH was positive. Follow-up data were available for three with positive margins: one relapsed while the other two were cured.

Conclusions and clinical relevance: Wide clinical surgical margins are always recommended for neoplastic conditions, yet there was no evidence that CISH margin examination would be beneficial in predicting recurrence in this viral-induced lesion.

Hintergrund: Das Feline Bowen Carcinoma in situ (BISC) wird häufig mit dem Felis catus Papillomavirus‐2 (FcaPV‐2) in Verbindung gebracht. Obwohl eine chirurgische Exzision des BISC für kurativ gehalten wird, werden wiederkehrende Veränderungen beschrieben und es ist nicht bekannt, ob es sich dabei um die Konsequenz einer unvollständigen Chirurgie oder eine residuale Viruslast handelt.

Ziele: Das Ziel war eine Kombination der kolorimetrischen in situ Hybridisierung (CISH) und einer quantitativen (q)PCR zu Erkennung der viralen DNA und zur Korrelation der klinischen Ergebnisse von Katzen mit BISC, bei denen FcaPV‐DNA in den chirurgischen Exzisionsrändern gefunden wurde.

Tiere: Siebenundzwanzig Katzen mit der histopathologischen Diagnose eines BISC.

Materialien und methoden: Die Schnitte aus dem Zentrum und den Rändern der Läsionen wurden zur histopathologischen Evaluierung, zu qPCR und CISH herangezogen. Nach der chirurgischen Entfernung der Läsionen wurden Follow‐Up daten für 6 Monate festgehalten.

Ergebnisse: Sechs der 12 Fälle, in denen alle vier histologischen Ränder evaluiert worden waren, wurden verwendet, um den Infektionsstatus dieser Ränder mit den Follow‐Up Daten zu korrelieren. Bei vier Fällen war der Rand positiv, von diesen zeigte die Hälfte einen zu erwartenden Rückfall und die Hälfte heilte ab; zwei Fälle waren negativ, von denen einer erwartungsgemäß abheilte, während der andere einen Rückfall zeigte. Fünfzehn Fälle, bei denen nur drei, zwei oder einer der histologischen Ränder evaluiert worden waren, wurden als signifikant erachtet, um entsprechend mit dem Status der Infektion und den Follow‐Up Daten, wenn CISH positiv war, korreliert zu werden. Follow‐Up Daten gab es für drei mit einem positiven Rand: einer zeigte einen Rückfall, während die beiden anderen abheilten.

Schlussfolgerungen und klinische bedeutung: Bei Neoplasien werden immer weite chirurgische Ränder empfohlen, es ergab sich jedoch keine Evidenz, dass eine Untersuchung der CISH‐Ränder sich auf die Vorhersage eines möglichen Wiederauftretens dieser Virus‐induzierten Läsionen günstig auswirken würde.

背景: 猫鲍温样原位癌 (BISC) 通常与猫乳头瘤病毒 2 (FcaPV‐2) 有关。尽管手术切除 BISC 有望治愈,但据报道有复发性病变,尚不清楚这是手术不完整还是残留病毒载量的结果。 目的: 结合比色原位杂交 (CISH) 和定量 (q)PCR 检测病毒 DNA,并与在手术边缘检测到 FcaPV‐2 DNA 的 BISC 猫的临床结果相关联。 动物: 27 只经组织病理学诊断为 BISC 的猫。 材料和方法: 包括病变核心和边缘的切片用于组织病理学评估、qPCR 和 CISH。手术切除病变后,记录 6 个月的临床随访数据。 结果: 12 例病例中,有 6 例的四个组织学边缘均可评估,这些病例被用于将边缘感染状态与随访数据关联起来。4 例显示边缘阳性,其中一半如预期复发,一半治愈;2 例为阴性,其中一例如预期治愈,另一例复发。15 例病例中,只有三个、两个或一个组织学边缘可评估,如果 CISH 为阳性,则被认为足以将感染状态与随访数据关联起来。3 例阳性边缘的病例有随访数据:1 例复发,另 2 例治愈。 结论和临床意义: 对于肿瘤性疾病,始终建议使用较宽的临床手术边缘,但没有证据表明 CISH 边缘检查有助于预测这种病毒诱发病变的复发。.

Contexte: Le carcinome in situ de Bowen félin (BISC) est fréquemment associé au papillomavirus Felis catus‐2 (FcaPV‐2). Bien que l'excision chirurgicale du BISC est censée être curative, des lésions récidivantes sont rapportées et on ne sait pas si elles sont la conséquence d'une chirurgie incomplète ou d'une charge virale résiduelle.

Objectifs: Combiner l'hybridation colorimétrique in situ (CISH) et la PCR quantitative (q)pour la détection de l'ADN viral, et corréler le résultat clinique des chats atteints de BISC dans lesquels l'ADN du FcaPV‐2 est détecté au niveau des marges chirurgicales.

Animaux: Vingt‐sept chats ayant reçu un diagnostic histopathologique de BISC. MATÉRIELS ET MÉTHODES: Des coupes comprenant la partie centrale et les marges des lésions ont été utilisées pour l'évaluation histopathologique, la qPCR et la CISH. Après l'ablation chirurgicale de la lésion, les données de suivi clinique ont été enregistrées pendant 6 mois. RÉSULTATS: Six des 12 cas dans lesquels les quatre marges histologiques étaient évaluables ont été utilisés pour corréler le statut de l'infection au niveau des marges avec les données de suivi. Quatre ont montré une positivité des marges, dont la moitié a rechuté comme prévu et l'autre moitié a guéri ; deux cas étaient négatifs, dont l'un a guéri comme prévu tandis que l'autre a rechuté. Quinze cas, où seulement trois, deux ou une des marges histologiques étaient évaluables, ont été considérés comme significatifs pour corréler de manière adéquate le statut de l'infection avec les données de suivi si la CISH était positive. Des données de suivi étaient disponibles pour trois cas dont les marges étaient positives: l'un d'entre eux a rechuté, tandis que les deux autres ont guéri.

Conclusions et pertinence clinique: Des marges chirurgicales cliniques larges sont toujours recommandées pour les affections néoplasiques, mais rien n'indique que l'examen des marges par la CISH serait utile pour prédire la récurrence de cette lésion d'origine virale.

背景: 猫のボーエン様表皮内癌(BISC)は頻繁にFelis catus papillomavirus‐2 (FcaPV‐2)に関連している。BISCの外科的切除は治癒が期待されるが、再発病変が報告され、それが不完全な手術の結果か、残留ウイルス負荷の結果なのかはわかっていない。 目的: 本研究の目的は、ウイルスDNA検出のためにcolorimetric in situ ハイブリダイゼーション (CISH)および定量的PCR(qPCR)を組み合わせ、外科マージンにFcaPV‐2 DNAが検出されるBISC罹患猫の臨床転帰を相関させることであった。 材料と方法: 病理組織学的評価、qPCRおよびCISHには、病変の中心部および辺縁を含む切片を用いた。病変の外科的切除後、6ヵ月間の臨床経過観察データを記録した。 結果: 組織学的マージン4カ所すべてが評価可能であった12症例中6症例を用いて、マージンの感染状態および追跡調査データとの関連付けを行った。4例はマージン陽性で、そのうち半数は予想通り再発し、半数は治癒した。2例は陰性で、うち1例は予想通り治癒したが、もう1例は再発した。組織学的マージンのうち3箇所、2箇所または1箇所のみが評価可能であった15例は、CISHが陽性であった場合、感染状態と追跡調査データとの関連付けが適切に行われることが重要であると考えられた。マージン陽性であった3症例の追跡データが得られたが、1例は再発し、他の2例は治癒した。 結論と臨床的意義: 腫瘍性疾患では、臨床的に外科的マージンを広くとることが常に推奨されるが、このウイルス誘発性病変では、CISHマージン検査が再発の予測に有益であるという証拠はなかった。.

Contexto: O carcinoma Bowenoide in situ felino (BISC) é frequentemente associado ao papilomavírus Felis catus‐2 (FcaPV‐2). Embora se espere que a excisão cirúrgica do BISC seja curativa, lesões recorrentes são relatadas e não se sabe se é consequência de cirurgia incompleta ou de carga viral residual.

Objetivos: Combinar hibridização colorimétrica in situ (CISH) e PCR quantitativa (q) para detecção de DNA viral e correlacionar o resultado clínico de gatos com BISC nos quais o DNA FcaPV‐2 foi detectado nas margens cirúrgicas.

Animais: Vinte e sete gatos com diagnóstico histopatológico de BISC. MATERIAIS E MÉTODOS: Secções histológicas incluindo o centro e as margens das lesões foram utilizadas para avaliação histopatológica, qPCR e CISH. Após a remoção cirúrgica da lesão, os dados de acompanhamento clínico foram registrados por 6 meses.

Resultados: Seis dos 12 casos em que todas as quatro margens histológicas foram avaliáveis foram utilizados para correlacionar o status da infecção nas margens com os dados de acompanhamento. Quatro apresentaram positividade em margens, dos quais metade recidivou como esperado e metade foi curada; dois casos foram negativos, dos quais um curou como esperado enquanto o outro recidivou. Quinze casos, onde apenas três, duas ou uma das margens histológicas foram avaliáveis, foram considerados significativos para correlacionar adequadamente o status da infecção com os dados de acompanhamento se CISH fosse positivo. Dados de acompanhamento estavam disponíveis para três com margens positivas: um recidivou enquanto os outros dois foram curados. CONCLUSÕES E RELEVÂNCIA CLÍNICA: Margens cirúrgicas clínicas amplas são sempre recomendadas para condições neoplásicas, mas não houve evidências de que o exame da margem para CISH seria benéfico na previsão de recorrência nesta lesão induzida por vírus.

INTRODUCCIÓN: El carcinoma in situ bowenoide felino (BISC) se asocia frecuentemente con el virus del papiloma humano tipo 2 (FcaPV‐2). Aunque se espera que la extirpación quirúrgica del BISC sea curativa, se han reportado lesiones recurrentes y no se sabe si es consecuencia de una cirugía incompleta o de una carga viral residual.

Objetivos: Combinar la hibridación in situ colorimétrica (CISH) y la PCR cuantitativa (q) para la detección del ADN viral, y correlacionar el resultado clínico de los gatos con BISC en los que se detecta ADN de FcaPV‐2 en los márgenes quirúrgicos.

Animales: Veintisiete gatos con diagnóstico histopatológico de BISC. MATERIALES Y MÉTODOS: Se utilizaron secciones que incluían el núcleo y los márgenes de las lesiones para la evaluación histopatológica, la PCR cuantitativa y la CISH. Después de la extirpación quirúrgica de la lesión, se registraron los datos de seguimiento clínico durante 6 meses.

Resultados: Se utilizaron seis de los 12 casos en los que los cuatro márgenes histológicos eran evaluables para correlacionar el estado de la infección en los márgenes con los datos de seguimiento. Cuatro mostraron positividad de los márgenes, de los cuales la mitad recidivó como se esperaba y la otra mitad se curó; dos casos fueron negativos, de los cuales uno se curó como se esperaba mientras que el otro recidivó. Quince casos, en los que solo tres, dos o uno de los márgenes histológicos eran evaluables, se consideraron significativos para correlacionar adecuadamente el estado de la infección con los datos de seguimiento si la CISH era positiva. Se disponía de datos de seguimiento para tres con márgenes positivos: uno recidivó mientras que los otros dos se curaron. CONCLUSIONES Y RELEVANCIA CLÍNICA: Siempre se recomiendan márgenes quirúrgicos clínicos amplios para las afecciones neoplásicas, pero no hubo evidencia de que el examen de márgenes mediante CISH fuera beneficioso para predecir la recurrencia en esta lesión inducida por virus.

Keywords: Bowenoid in situ carcinoma (BISC); FcaPV‐2; feline papillomavirus; relapse; skin; surgical excision.

MeSH terms

  • Animals
  • Bowen's Disease / diagnosis
  • Bowen's Disease / pathology
  • Bowen's Disease / surgery
  • Bowen's Disease / veterinary
  • Bowen's Disease / virology
  • Carcinoma in Situ / diagnosis
  • Carcinoma in Situ / pathology
  • Carcinoma in Situ / surgery
  • Carcinoma in Situ / veterinary
  • Carcinoma in Situ / virology
  • Cat Diseases* / diagnosis
  • Cat Diseases* / pathology
  • Cat Diseases* / surgery
  • Cat Diseases* / virology
  • Cats
  • Colorimetry* / methods
  • Colorimetry* / veterinary
  • DNA, Viral
  • Female
  • In Situ Hybridization* / veterinary
  • Male
  • Papillomaviridae / genetics
  • Papillomaviridae / isolation & purification
  • Papillomavirus Infections* / diagnosis
  • Papillomavirus Infections* / veterinary
  • Papillomavirus Infections* / virology
  • Prognosis
  • Skin Neoplasms / diagnosis
  • Skin Neoplasms / pathology
  • Skin Neoplasms / surgery
  • Skin Neoplasms / veterinary
  • Skin Neoplasms / virology

Substances

  • DNA, Viral

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